Search for content and authors
 

Wykrywanie apoptozy hepatocytów za pomocą metody TUNEL i immunocytochemicznego wykrywania kaspazy-3 obiektywizacja wyników

Marcin M. Chmielewski 2Krzysztof K. Linke 1Maciej Zabel Rafał Spachacz 

1. Akademia Medyczna w Poznaniu (AM Poznań), Fredry 4, Poznań 60-422, Poland
2. Akademia Medyczna, Katedra i Klinika Gastroenterologii, Żywienia Człowieka i Chorób Wewnętrznych, Przybyszewskiego 49, Poznań 60-355, Poland

Abstract

Wstęp: Apoptoza hepatocytów jest jedną z postaci obumierania komórkowego i stanowi o homeostazie wątroby. Analiza tego zjawiska w przewlekłych schorzeniach prowadzi do lepszego zrozumienia procesów jakie toczą się w uszkodzonej wątrobie.
Cele pracy: Ocena nasilenia zjawiska apoptozy hepatocytów w przewlekłych schorzeniach wątroby i zobiektywizowanie tego dwoma metodami badawczymi.
Metodyka: Badaniem objęto 68 chorych i 5 zdrowych, stanowiących kontrolę. U 7 rozpoznano nieaktywną marskość wątroby, u 11 marskość aktywną, 12 przewlekłe przetrwałe zapalenie wątroby, 29 przewlekłe agresywne zapalenie wątroby i u 9 stłuszczenie. Skrawki parafinowe wątroby barwiono metodą immunocytochemiczną na obecność aktywnej kaspazy-3, skrawki mrożeniowe zaś metodą TUNEL wykrywającą końce 3,-OH pociętego DNA jądrowego hepatocytów. Wszystkie preparaty podbarwiono hematoksyliną. Wyniki weryfikowano testem Mann,a-Whitney,a i Kruskala-Wallisa, a zależności metodą korelacji Spearman,a.
Wyniki: Analiza mikroskopowa wykazała obecność pojedynczych, zmienionych apoptotycznie komórek wątrobowych. Test porównujący zgodność użytych metod badawczych z zastosowaniem korelacji Spearman,a wykazał istotną statystycznie zależność między wykrywaniem apoptozy metodą immunocytochemiczną i metodą TUNEL (r=0.438). Test Kruskala-Wallisa dla zmiennych niepowiązanych nie stwierdził istotnie statystycznej różnicy w liczbie hepatocytów zmienionych apoptotycznie w podgrupach histologicznych wykrywanych metodą immunocytochemiczną i TUNEL (p>0.05).
Wnioski: W przewlekłych schorzeniach wątroby dochodzi do apoptozy hepatocytów, lecz nasilenie tego zjawiska nie jest tak duże, jak oczekiwano. Wydaje się, że obie metody badawcze nadają się do oceny apoptozy hepatocytów i mogą być używane zamiennie. Nie zaobserwowano różnicy między natężeniem apoptozy, a zaawansowaniem patologii wątroby.

 

Legal notice
  • Legal notice:
 

Related papers

Presentation: poster at XI Kongres PTG-E, Sesja plenarna 3., by Marcin M. Chmielewski
See On-line Journal of XI Kongres PTG-E

Submitted: 2004-03-30 16:07
Revised:   2009-06-08 12:55