Cel pracy - ocena częstości zakażeń enterokrwotocznym szczepem Escherichia coli O157 wśród chorych hospitalizowanych z rozpoznaniem krwotocznego zapalenia okrężnicy.
Materiał - Badaniu poddano próbki kału 34 hospitalizowanych chorych (21 kobiet i 13 mężczyzn, w wieku 17 - 78 lat).
Metody - Rozpoznanie postawiono na podstawie obrazu endoskopowego jelita grubego chorych hospitalizowanych z powodu biegunki z domieszką krwi (wykluczono colitis ulcerosa i chorobę Crohna). Próbki kału pobrano między 3 a 12 dniem choroby. Izolacji bakteryjnego DNA dokonano z zastosowaniem QIA Amp Stool DNA Mini Kit. Przeprowadzono dwie równoległe reakcje PCR. W pierwszej próbie stosowano zestaw starterów sekwencji stx1, stx2, eaeA, EHEC hlyA. Druga reakcja prowadzona była w kierunku wykrycia E. coli O111 oraz O157. Elektroforezę produktu PCR przeprowadzono w 2% żelu agarozowym z dodatkiem bromku etydyny. Odczytu dokonano w świetle UV w stosunku do markera masowego DNA pUC/Mspl.
Wyniki - U dwóch osób stwierdzono występowanie enterokrwotocznych szczepów E. coli.
W próbce kału 22 - letniego mężczyzny obserwowano obecność sekwencji charakterystycznej dla stx 2, ale nie był to szczep O157 ani O111. U 78 - letniej kobiety stwierdzono dodatnią reakcję na obecność O157 oraz toksyny stx1. Chora ta hospitalizowana była z powodu ostrej biegunki ze znaczną ilością krwi w pierwszych trzech dniach choroby. Źródłem zakażenia mogła być sałata. Chora negowała spożycie wołowiny, cielęciny i picie niepasteryzowanego mleka. W badaniu sigmoidoskopowym stwierdzono ostry stan zapalny prostnicy, esicy oraz dystalnego odcinka zstępnicy (obrzęk, zatarcie rysunku naczyniowego, pojedyncze, podłużne owrzodzenia, liczne wybroczyny podśluzowe). Największe nasilenie zmian obserwowano w zstępnicy.
Wnioski - Enterokrwotoczne szczepy E. coli mogą być przyczyną krwotocznych zapaleń okrężnicy. Identyfikacja wymaga oznaczenia szeregu czynników, które decydują o patogenności szczepu. Nowoczesne metody oparte o biologię molekularną pozwalają na szybką diagnostykę zakażeń. Wyniki potwierdzające występowanie enterokrwotocznych szczepów E. coli O157 u chorych z krwotocznym zapaleniu okrężnicy dowodzą, że diagnostyka tych zakażeń jest uzasadniona, a Multiplex PCR może być doskonałym narzędziem pozwalającym na szybkie rozpoznanie i prawidłowe leczenie.
|