Bakterie kwasu mlekowego (LAB) znalazły szczególne uznanie jako bakterie probiotyczne. Dotychczas wykazano, że LAB modyfikują pH przewodu pokarmowego, wytwarzają czynniki blokujące działanie chorobotwórczych drobnoustrojów, współzawodniczą z drobnoustrojami patogennymi o receptory komórkowe, składniki pokarmowe i czynniki wzrostowe, jak również sytymulują nieswoiste i swoiste reakcje odpornościowe. Mechanizmy indukcji tych aktywności nie są jednak jeszcze ostatecznie poznane.
Celem niniejszej pracy było: 1) ustalenie typu komórek odpowiadających na stymulację komórek jednojądrzastych krwi obwodowej (PBMC) pojedynczymi szczepami bakterii kwasu mlekowego (L. bulgaricus, L. acidophilus, B. bifidum) oraz parami i mieszaniną wszystkich trzech wymienionych szczepów bakterii (jako kompozycja preparatu Trilac), 2) określenie profilu odpowiedzi odpornościowej PBMC indukowanych badanymi szczepami bakterii, 3) ustalenie czy kompozycja różnych szczepów LAB wpływa na profil tej odpowiedzi.
Metody: W celu określenia transformacji blastycznej PBMC wykorzystano zdolność proliferujących komórek do pobierania ze środowiska reakcji wyznakowanej trytem tymidyny. Do oceny stężeń cytokin w nadsączach hodowlanych PBMC wykorzystano technikę ELISA, a dla określenia markerów powierzchniowych limfocytów i monocytów metodę dwubarwnej cytometrii przepływowej.
Wyniki: Stwierdzono, że badane szczepy bakterii kwasu mlekowego są słabo immunogenne, co manifestowało się niskim poziomem proliferacji PBMC w hodowlach 7 dniowych. Wykazano, że subpopulacją komórkową odpowiedzi proliferacyjnej PBMC indukowanych badanymi szczepami LAB są limfocyty T CD4+.Stwierdzono ponadto że, głównymi komórkami odpowiadającymi na stymulację in vitro LAB są monocyty. Wzrost ekspresji receptorów błonowych takich jak CD80, CD86, HLA-DR, CD54 może świadczyć o zaangażowaniu tych komórek w reakcji prezentacji antygenu, natomiast zwiększenie ekspresji markerów CD14 i CD25 o udziale monocytów w reakcjach efektorowych. Badania wydzielania cytokin (IFN-gamma, TNF-alfa, IL-12, IL-10) wykazały, że profil odpowiedzi układu odpornościowego zależy ściśle od zastosowanego szczepu LAB. Wyniki prezentowanych badań pozwoliły na stwierdzenie, że kompozycja bakterii preparatu Trilac spełnia kryteria niezbędne dla aktywności probiotyków. Stwarza możliwość indukcji w populacji PBMC tych aktywności komórek układu odpornościowego, które z jednej strony warunkują działania przeciwinfekcyjne i przeciwzapalne, a ogranicza odpowiedź zapalną, przez co może wpływać na utrzymanie stanu tolerancji na antygeny zewnętrzne.
|